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Artel双比率光度法

比率光度法

Artel在化学染料、计量学以及小体积移液处理方面的专家和比率光度法,为提供极其准确和高精度的体积检测系统奠定了基础。我们发现了重量法、荧光法和单染料光度法体积验证方面的局限性,因此开发了双染料比率光度法,该方法操作简单、效率高、校验结果可靠。

MVS符合以下要求:

  • ISO 23783-2:2022 中描述的双染料比例光度法;
  • ISO/IWA 15:2015 中描述的用于自动移液工作站的比例光度法;
  • ISO 8655-7:2022 手持式多通道移液器的测试和校准要求;
  • CLSI QMS23:2019, ISO 17025:2017, cGMP 和cGLP 对手持式或自动化液体处理系统的测试和校准要求;
  • ArtelWare软件可在要求符合21 CFR Part11 的实验室中使用。

PCS符合以下要求:

  • ISO 8655-7:2022 中描述的双染料比率光度法;
  • ISO 8655-8:2022 中描述的光度参考测量程序。
  • CLSI QMS23:2019, ISO 17025:2017, cGMP 和cGLP 中描述的测试和校准要求。
  • ArtelWare软件可用于要求符合21 CFR Part11 的实验室。

Artel基于朗勃-比尔定律

我们的体积校验系统采用双染料,双波长吸光度测量来确定从移液器或移液设备所移取溶液的目标体积。两种染料,分别在520nm(红色)和730nm(蓝色)具最大吸光度值,使这种测量成为可能。

体积测量是通过应用朗伯-比尔定律来确定的,该定律指出,染料的吸光度(A)与染料浓度(C, gL-1)、染料的摩尔吸光系数(ε, L-1 cm-1)和光路穿过的样品长度(l, cm)的乘积成正比。
A = ε ℓ C

Artel的标准溶液经过严格控制,其中染料的浓度(C)和摩尔吸光系数(ε)已知,根据比尔-朗伯定律获得上式中的l,即光束在MVS系统中穿过的光程。

从光程长度和容器(微板孔)的尺寸信息,我们可以计算移取溶液的总体积。通过测量不同波长的第二种染料并应用比率光度法原理(该方法优势见下文),我们能够获得更高的测量精度,并且可以准确地测量低至10 nL (0.010 μL)的移液体积。

比率光度法的优势

使用Artel标准溶液进行的比率光度测量,提供可追溯到国际单位制(SI)的高精度小体积液体的测量。

比率光度法是一种改进的光度法,旨在克服传统的单染料光度法体积测量的精度限制,采用两种标准化的染料,分别获取两种染料的吸光度读数,可得到比率吸光度值。

同一时间同一仪器测量的两个吸光度的比值比单吸光度测量更准确——由于光学缺陷、光程的变化和光度计非线性等原因导致的测量误差被同时引入到两个测量中,从而使误差在比值中抵消。这使得比率法比传统的单染料光度法具有更高的准确度。这种误差的自我抵消使小体积测量具有出色的准确性。

与基于荧光的移液体积校验法相比,比率光度法通过使用一种染料作为内标,另一种染料作为样品,提供了可追溯的准确性和精度。与重量法相比,比例光度法速度更快,使用方便,不受环境影响,并且在小体积下精度更高。1,2

PCS 和 MVS采用标准化染料溶液、具有自动计算功能的先进软件和数据管理,使比率光度法检测更容易和可追溯。除了易于使用之外,它们还可以使不同地点、不同液体设备获得一致的、可比较的数据。PCS和MVS为移液设备提供了全球标准。

1. Bradshaw, J. T. & Albert, K. J. in Pr. Approaches Method Valid. Essent. Instrum. Qualif. (Chan, C. C., Lam, H. & Zhang, X. M.) 347–375 (John Wiley & Sons, Inc., 2010). <http://onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1002/9780470630716.ch15/summary>

2. Rodrigues, G. & Curtis, R. in Pr. Approaches Method Valid. Essent. Instrum. Qualif. (Chan, C. C., Lam, H. & Zhang, X. M.) 327–346 (John Wiley & Sons, Inc., 2010). <http://onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1002/9780470630716.ch14/summary>