液体处理体积范围 (μL) | (误差)误差(%) | (变异系数)CV(%) | |
PCRMix B | 49.99~10.00 | 1.54~1.90 | 0.15~0.20 |
PCRMix C | 9.999~2.000 | 1.46~1.63 | 0.15~0.20 |
图2 该数据展示了在~4°C下经PCRMix QualAssure溶液优化过的ALH对PCRMix样品溶液以及主流的商业化主混合物的移液体积的比较。
图1 实验结果表明,在~4°C条件下,利用PCRMix QualAssure溶液优化过的ALH分别移取9.9μl的QualAssure和PCRMix QualAssure的结果。
PCR主混合物的体积对qPCR结果有直接影响。qPCR反应的准确性取决于主混合物的性能和添加量。主混合移液体积不足可能导致意想不到的Cq值。在这个例子中,如果科学家不小心将主混合物少添加了40%(应该移取10µL,但实际上只有6µL),获得的结果将显著高于准确添加主混合物体积的Cq值。错误的高Cq值将产生错误的低浓度,最终转化对为样品中感兴趣的基因的错误定量。这已错误将进一步导致病人被误诊的可能性。这一切都源于主混合物的移液体积不准确。
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