高效hiPSC单细胞克隆，同时维持hiPSC核型

人类诱导多能干细胞（hiPSCs）在药物发现、合成生物学和细胞疗法方面的应用越来越广泛。然而，对hiPSCs进行强有力的单细胞操作一直是一个重大的生物学和技术障碍。当前的技术依赖于效率低下的方法，如限制稀释（LD）、集落挑选和荧光激活细胞分选（FACS），这些方法耗时、昂贵，并且与hiPSCs的敏感性不兼容。此外，这些方法提供的克隆性证据不足。本应用说明描述了如何利用VIPS仪器与优化的培养条件相结合，成功地以健壮和自动化的方式克隆了多个不同的hiPSC细胞系。

这种方法已被证明能够减少时间和成本，同时最重要的是保持细胞表型和基因组完整性，并提供记录的细胞系克隆性证据。首先，我们展示了VIPS加MatriClone作为平台组合，在单个播种的hiPSCs的克隆集落生长方面，与手动LD相比，结果是3到4倍的改善。其次，选择了来自四个细胞系的三个假定健康或疾病受影响的hiPSC子克隆进行扩增和扩展特性表征，经过VIPS播种和整孔成像。确认了每个子克隆细胞系的多能性表达。最后，我们证明了在延长培养和成功神经元分化后，这些子克隆维持了hiPSCs的关键特征，包括基因组的完整性和稳定性，以证明其潜能。